IDT埃德特 CRISPR 核酸酶

用于基因组编辑实验的高纯度重组核酸内切酶

品　牌：IDT埃德特
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用于基因组编辑实验的高纯度重组核酸内切酶

产品介绍

产品特点：

核定位信号 (Nuclear localization signal, NLS) 提高了基因组编辑效率

用于构成核糖核蛋白 (ribonucleoprotein, RNP) 复合物

高纯度酶

Cas9核酸酶

重组化脓性链球菌Cas9核酸酶，从表达核酸酶的大肠杆菌菌株中纯化。

包含核定位序列（NLS）和 C 末端 6-His 标签。

以 10 μg/μL 的溶液形式提供，100 μg Cas9 核酸酶 = 610 pmol。

产品	货号
Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 100 µg	1081058
Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 500 µg	1081059
Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 5 mg	10000735
Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 100 µg	1081060
Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 500 µg	1081061
Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 5 mg	10007803

SpCas9 Nuclease (Glycerol-Free)

产品	货号
Alt-R™ S.p. Cas9 V3, glycerol-free, 100µg	10007806
Alt-R™ S.p. Cas9 V3, glycerol-free, 500µg	10007807
Alt-R™ S.p. Cas9 V3, glycerol-free, 5mg	10007808

Cas9-GFP (or RFP) Nuclease

产品	货号
Alt-R™ S.p. Cas9-GFP V3, 100 µg	10008100
Alt-R™ S.p. Cas9-GFP V3, 500 µg	10008161
Alt-R™ S.p. Cas9-RFP V3, 100 µg	10008162
Alt-R™ S.p. Cas9-RFP V3, 500 µg	10008163

Cas9 Nickase

产品	货号
Alt-R™ S.p. Cas9 D10A Nickase V3, 100 µg	1081062
Alt-R™ S.p. Cas9 D10A Nickase V3, 500 µg	1081063
Alt-R™ S.p. Cas9 H840A Nickase V3, 100 µg	1081064
Alt-R™ S.p. Cas9 H840A Nickase V3, 500 µg	1081065

dCas9 Protein

Cas12a 核酸酶

As Cas12a (Cpf1) Nuclease

产品	货号
Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg	10001272
Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg	10001273
Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg	10007804
Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 100 µg	1081068
Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 500 µg	1081069

Lb Cas12a (Cpf1) Nuclease

产品	货号
Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg	10007922
Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg	10007923
Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg	10007924

应使用哪种 Cas9 酶

Cas12a (Cpf1) 蛋白

Alt-R A.s. Cas12a (Cpf1) V3 核酸酶

Alt-R A.s. Cas12a (Cpf1) Nuclease V3 enzyme is a high purity, recombinant Acidaminococcus sp. BV3L6 Cas12a. 当没有 Cas9 特异性 PAM 序列 (NGG) 时，这种酶对于靶向 AT 富集区非常有用。这些酶包括核定位序列 (nuclear localization sequences, NLS) 和 C 末端 6-His 标签。Cas12a 酶必须与 gRNA 结合才能产生一种功能性的目标特异性编辑复合物。为了获得出色的编辑效果，将 Alt-R A.s. Cas12a (Cpf1) 核酸酶 V3 与经优化的 Alt-R CRISPR-Cas12a (Cpf1) crRNA 等摩尔量结合。

使用 Cas9 或 Cas12a (Cpf1) 进行 CRISPR 基因组编辑的比较

	Cas9 系统	Cas12a 系统
应用	一般的基因组编辑	用于基因组中富含 AT 的物种用于设计空间有限、不能使用 CRISPR-Cas9 系统的区域
核糖核蛋白组分	gRNA 选择： crRNA 和 tracrRNA sgRNA Cas9 核酸内切酶	crRNA Cas12a 核酸内切酶
变体	野生型 HiFi 切口酶（H840A 和 D10A） Cas9-GFP（或 RFP）	野生型 Ultra（性能更佳）
Cas9 crRNA:tracrRNA（选择 1）	crRNA 天然：42 nt Alt-R：35–36 nt（建议 36 nt） tracrRNA 天然：89 nt Alt-R：67 nt	—
Cas9 sgRNA（选择 2）	Alt-R：99–100 nt（建议 100 nt）	—
Cas12a crRNA	—	天然：42–44 nt Alt-R：40–44 nt（建议 41 nt）
CRISPR 酶	Class 2，Cas type II M.W.*：162,200 g/mol 核酸内切酶结构域：RuvC-like 和 HNH	Class 2，Cas type V M.W.*：156,400 g/mol 核酸内切酶结构域：仅 RuvC-like
DNA 切割	野生型和 HiFi：在前间隔序列上游 3 个碱基位置切割，形成平末端 D10A 切口酶和配对 gRNA：5′ 黏末端 H840A 切口酶和配对 gRNA：3′ 黏末端 PAM 位点在基因组编辑过程中经常被破坏	在前间隔序列的 5′ 端切割，形成 5′ 黏末端 PAM 位点在基因组编辑后可能会继续存在
PAM 序列^†	NGG	对于 Cas12a V3，为 TTTV 对于 Cas12a Ultra，为 TTTN
当前建议导入 Alt-R RNP 的方法	脂质体转染电穿孔（建议使用 Alt-R 增强子）显微注射	电穿孔（建议使用 Alt-R 增强子）显微注射

* Alt-R 核酸酶的分子量
^† N = 任意碱基；V = A、C、或 G

产品	货号
Alt-R™ S.p. dCas9 Protein V3, 100 µg	1081066
Alt-R™ S.p. dCas9 Protein V3, 500 µg	1081067

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